产品货号：
WH0003
中文名称：
全血基因组DNA提取试剂盒（0.1-1ml)
英文名称：
Extraction kit for genomic DNA from blood（0.1-1ml)
产品规格：
50次|200次
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取血液中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒纯化的DNA适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等各种常规实验，和芯片杂交、高通量测序等高质量DNA需求的实验。
试剂盒特点：
1．快速无毒：采用硅胶膜吸附原理，无需酚/氯仿，1h内即可完成实验。
2．下游应用广泛：配合可选的CLA处理步骤，可获得高OD260/230比值的DNA，满足芯片杂交，高通量测序等对DNA纯度高的需求。
3．样本适用广泛：可从抗凝血、白膜层和禽类血等样品中直接提取DNA。
4．高质量：独特的裂解缓冲体系，纯化的DNA具有高浓度，高纯度，完整性好等特点。
试剂盒组成：
保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。
选购试剂：RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小、提取量下降。
2．若缓冲液GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
3．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。
4．如样本为血凝块，推荐使用血凝块基因组DNA提取试剂（WH0006），或可购买液化柱CX1（WH9001）配合WH0003使用。
5．如需去除RNA残留，需自备RNase A（100mg/ml）溶液（WH0217）
提取得率：
使用方法：
使用前先在漂洗液PWB中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理血液样品（本产品适用于处理100μl-1 ml血液样品）：
a．提取200 μl血液样品时，可直接进行下一步实验。
b．提取小于200 μl血液样品时，可加缓冲液GS补足体积至200 μl，再进行下一步实验。
注意：步骤a和b适用于大多数100-200 μl血液样品的提取，但有些血液样品由于蛋白，糖类，脂类含量较多或样本储存条件不佳会导致OD260/OD230比值偏低，如需提高OD260/OD230比值可在样品中加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL进行处理，具体步骤同c。
c．提取大于200 μl血液样品时，需细胞裂解液CL处理，具体步骤如下：在样品中加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL，颠倒混匀，10000rpm （~11500×g )离心1min，吸去上清，留下细胞核沉淀（如果裂解不彻底，可加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL重复裂解一次），向细胞核沉淀中加200 μl缓冲液GS，振荡至彻底混匀，再进行下一步实验。
d．当处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，红细胞有核细胞，因此处理量为5-20 μl，加缓冲液GS补足200 μl，再进行下一步实验。
e．当处理血样为血凝块，可选择液化柱CX1（WH9001）（需自备）对血凝块进行液化处理，具体步骤如下：
e1．取血凝块至液化柱CX1中，12000rpm（~11500×g)离心1 min，收集滤液（若血凝块量大可分批多次过柱离心，收集滤液)。
e2．取100μl-1 ml滤液加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL，颠倒混匀，10000rpm （~11500×g )离心1 min，吸去上清，留下细胞核沉淀（如果裂解不彻底，可加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL重复裂解一次），向收集到的细胞核沉淀中加200 μl缓冲液GS，振荡至彻底混匀，再进行下一步实验。
注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A （100mg/ml)溶液（WH0217) （需自备)至上述处理获得的200 μl样品中，振荡15 sec，室温放置5min。
2．加入200 μl缓冲液GB和20 μl Proteinase K的预混溶液至上述处理获得的200 μl样品中，充分颠倒混匀，56℃放置10min，其间颠倒混匀数次，溶液应变清亮（如溶液未彻底变清亮，请延长裂解时间至溶液清亮为止）。
注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般37℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。当血液体积≥200 μl且没有采用红细胞裂解处理，或是样本储存条件不佳，水浴后颜色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀。
注意：如果血液样品经过细胞裂解液CL处理，大多数情况下加入缓冲液GB充分颠倒混匀后，室温放置5 min（其间颠倒混匀1-2次）即可得到高质量基因组DNA。
3．室温放置2-5 min后加入350 μl缓冲液BD，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀。
4．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CG2中（吸附柱CG2放入收集管中），12000rpm（~13400×g )离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CG2放入收集管中。
5．向吸附柱CG2中加入500 μl缓冲液GDB，12000rpm（~13400×g )离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CG2放入收集管中。
6．向吸附柱CG2中加入600 μl漂洗液PWB （使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm （~13400×g )离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CG2放入收集管中。
7．重复操作步骤6。
注意：如果血样经过细胞裂解液CL处理，可省略步骤7。
8．12000rpm（~13400×g )离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CG2置于室温放置2 min，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
9．将吸附柱CG2转入1.5 ml离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TB，室温放置2 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min，将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CG2中，室温放置2 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
相关搜索：全血基因组DNA提取试剂盒（0.1-1ml)，少量血液基因组DNA柱式提取试剂盒，少量血液gDNA柱式提取试剂盒，少量血液基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱)
试剂盒特点：
1．快速无毒：采用硅胶膜吸附原理，无需酚/氯仿，1h内即可完成实验。
2．下游应用广泛：配合可选的CLA处理步骤，可获得高OD260/230比值的DNA，满足芯片杂交，高通量测序等对DNA纯度高的需求。
3．样本适用广泛：可从抗凝血、白膜层和禽类血等样品中直接提取DNA。
4．高质量：独特的裂解缓冲体系，纯化的DNA具有高浓度，高纯度，完整性好等特点。
试剂盒组成：
| 组分 | 50T | 200T |
| 细胞裂解液CL | 60ml | 250 ml |
| 缓冲液GS | 15 ml | 50 ml |
| 缓冲液GB | 15 ml | 50 ml |
| 缓冲液BD | 20 ml | 80 ml |
| 缓冲液GDB | 30 ml | 120 ml |
| 漂洗液PWB | 15 ml | 50 ml |
| 洗脱缓冲液TB | 15 ml | 60ml |
| Proteinase K | 1 ml | 4×1 ml |
| 吸附柱CG2 | 50个 | 200个 |
| 收集管（2 ml) | 50个 | 200个 |
| 1.5 ml离心管 | 50个 | 200个 |
保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。
选购试剂：RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小、提取量下降。
2．若缓冲液GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
3．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。
4．如样本为血凝块，推荐使用血凝块基因组DNA提取试剂（WH0006），或可购买液化柱CX1（WH9001）配合WH0003使用。
5．如需去除RNA残留，需自备RNase A（100mg/ml）溶液（WH0217）
提取得率：
| 样本 | 提取量（μl) | DNA得率（μg) |
| 哺乳动物全血 | 100-500 | 3-10 |
| 500-1000 | 10-30 | |
| 禽类、两栖类全血 | 5-20 | 5-40 |
| 血凝块 | 200-500 | 1-8 |
| 500-1000 | 8-15 |
使用方法：
使用前先在漂洗液PWB中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理血液样品（本产品适用于处理100μl-1 ml血液样品）：
a．提取200 μl血液样品时，可直接进行下一步实验。
b．提取小于200 μl血液样品时，可加缓冲液GS补足体积至200 μl，再进行下一步实验。
注意：步骤a和b适用于大多数100-200 μl血液样品的提取，但有些血液样品由于蛋白，糖类，脂类含量较多或样本储存条件不佳会导致OD260/OD230比值偏低，如需提高OD260/OD230比值可在样品中加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL进行处理，具体步骤同c。
c．提取大于200 μl血液样品时，需细胞裂解液CL处理，具体步骤如下：在样品中加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL，颠倒混匀，10000rpm （~11500×g )离心1min，吸去上清，留下细胞核沉淀（如果裂解不彻底，可加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL重复裂解一次），向细胞核沉淀中加200 μl缓冲液GS，振荡至彻底混匀，再进行下一步实验。
d．当处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，红细胞有核细胞，因此处理量为5-20 μl，加缓冲液GS补足200 μl，再进行下一步实验。
e．当处理血样为血凝块，可选择液化柱CX1（WH9001）（需自备）对血凝块进行液化处理，具体步骤如下：
e1．取血凝块至液化柱CX1中，12000rpm（~11500×g)离心1 min，收集滤液（若血凝块量大可分批多次过柱离心，收集滤液)。
e2．取100μl-1 ml滤液加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL，颠倒混匀，10000rpm （~11500×g )离心1 min，吸去上清，留下细胞核沉淀（如果裂解不彻底，可加入1-2.5倍血液样品体积的细胞裂解液CL重复裂解一次），向收集到的细胞核沉淀中加200 μl缓冲液GS，振荡至彻底混匀，再进行下一步实验。
注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A （100mg/ml)溶液（WH0217) （需自备)至上述处理获得的200 μl样品中，振荡15 sec，室温放置5min。
2．加入200 μl缓冲液GB和20 μl Proteinase K的预混溶液至上述处理获得的200 μl样品中，充分颠倒混匀，56℃放置10min，其间颠倒混匀数次，溶液应变清亮（如溶液未彻底变清亮，请延长裂解时间至溶液清亮为止）。
注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般37℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。当血液体积≥200 μl且没有采用红细胞裂解处理，或是样本储存条件不佳，水浴后颜色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀。
注意：如果血液样品经过细胞裂解液CL处理，大多数情况下加入缓冲液GB充分颠倒混匀后，室温放置5 min（其间颠倒混匀1-2次）即可得到高质量基因组DNA。
3．室温放置2-5 min后加入350 μl缓冲液BD，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀。
4．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CG2中（吸附柱CG2放入收集管中），12000rpm（~13400×g )离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CG2放入收集管中。
5．向吸附柱CG2中加入500 μl缓冲液GDB，12000rpm（~13400×g )离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CG2放入收集管中。
6．向吸附柱CG2中加入600 μl漂洗液PWB （使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm （~13400×g )离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CG2放入收集管中。
7．重复操作步骤6。
注意：如果血样经过细胞裂解液CL处理，可省略步骤7。
8．12000rpm（~13400×g )离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CG2置于室温放置2 min，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
9．将吸附柱CG2转入1.5 ml离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TB，室温放置2 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min，将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CG2中，室温放置2 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
相关搜索：全血基因组DNA提取试剂盒（0.1-1ml)，少量血液基因组DNA柱式提取试剂盒，少量血液gDNA柱式提取试剂盒，少量血液基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱)